Juliana Ramos Lopes defendeu, na Unesp de São José do Rio Preto, a tese de doutorado “Avaliação da ação da melatonina em células-tronco tumorais mamárias re-positivas tratadas com disruptores estrogênicos: verificação da via do receptor de estrógeno mediada pelo gene Oct 4” . A pesquisa foi realizada no Programa de Pós-Graduação em Genética.
Resumo
As neoplasias mamárias são os tumores de maior ocorrência em mulheres no mundo. A alta incidência desse tipo tumoral deve-se a um conjunto de fatores, entre eles o uso de hormônios, como o estrógeno e a exposição a produtos químicos, entre eles o Bisfenol A (BPA).
Apesar da introdução de tratamentos mais efetivos para o câncer de mama, muitas vezes ocorre recorrência e/ou crescimento do tumor, invasão e metástase. As “células-tronco tumorais” (CTTs) vem sendo estudadas em tumores humanos nos últimos anos, consideradas as responsáveis pela recorrência do tumor e resistência a terapias. Devido ao determinante papel das CTTs, é importante a identificação de fatores que controlam sua proliferação. Estudos identificaram o fator de transcrição OCT4 (octamer-binding transcription factor 4), como um dos responsáveis pela auto-renovação e manutenção da pluripotência das células-tronco. Dessa forma, o estudo de potenciais fármacos que atuem sobre esta população específica no câncer de mama tem especial interesse. A melatonina, parece apresentar efeitos oncostáticos, no entanto, pouco se sabe sob sua ação terapêutica sobre as células-tronco tumorais mamárias. Dessa forma, o objetivo deste estudo foi avaliar o efeito da melatonina sobre a regulação do marcador de células-tronco OCT4 pelo receptor de estrógeno em células-tronco tumorais mamárias, após o tratamento com estrógeno e bisfenol A.
Para o estudo, as células de câncer de mama humano MCF-7 e MDA-MB-231 foram submetidas ao cultivo tridimensional de mamosferas, representando as células-tronco. As CTTs foram cultivadas em suspensão celular ou em crescimento independente de ancoragem. Simultaneamente, as mamosferas foram tratadas com 1 mM melatonina, 10 nM estrógeno e/ou com 10 ?M bisfenol A. Ao final, foi avaliado o efeito da melatonina, estrógeno e bisfenol A sobre o crescimento celular, através da contagem do número de células, mensuração do tamanho das mamosferas e por meio do ensaio de viabilidade celular MTT. Além disso, a expressão gênica e proteica do OCT4 e do receptor de estrógeno (RE) foi avaliada por PCR em tempo real, western blotting e imunocitoquímica, respectivamente. Foi avaliada também a ligação do receptor de estrógeno ao gene OCT4 através do Ensaio de Imunoprecipitação da Cromatina (ChIP). Foi observado que o aumento no número e no tamanho das mamosferas induzidos pelo estrógeno ou BPA foi reduzido pelo tratamento com melatonina (P<0,05). Além disso, a ligação do receptor de estrógeno ao gene OCT4 foi reduzida, acompanhada por uma redução na expressão do OCT4 e do receptor de estrógeno (P<0,05).
Os resultados demonstram que a melatonina é eficaz no controle da proliferação das células-tronco tumorais mamárias in vitro, atuando na via do receptor de estrógeno, demonstrando seu potencial uso terapêutico no câncer de mama.
Comissão Examinadora
Prof.(a). Dr.(a). Débora Aparecida Pires de Campos Zuccari – Orientadora (Faculdade de Medicina de São José do Rio Preto – FAMERP)
Prof.(a). Dr.(a). Ana Paula Girol (Faculdades Integradas Padre Albino)
Prof.(a). Dr.(a). Patricia Simone Leite Vilamaior (Ibilce/Unesp SJRP)
Prof.(a). Dr.(a). Wilson Araújo da Silva Junior (Faculdade de Medicina de Ribeirão Preto)
Prof.(a). Dr.(a). Patricia Matos Biselli Chicote (Faculdade de Medicina de São José do Rio Preto – FAMERP)
Assessoria de Comunicação e Imprensa